1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
猪瘟是猪的一种高度接触性传染病,急性猪瘟死亡率几乎接近100%,被国际兽医局列为A类传染病。
针对目前我国畜牧业生产的现状,疫苗防治仍是主要的应对措施。
在几十年的时间里,中国兔化弱毒疫苗的生产工艺在不断改进和提高,相继创制了家兔脾淋组织苗、乳兔组织苗、犊牛睾丸细胞苗。
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2. 研究的基本内容和问题
BT 细胞是牛睾丸细胞,作为猪瘟细胞疫苗生产用细胞系,应检查其是否具有致瘤性。
为了客观评价BT传代细胞是否具有致瘤性,我们选择Balb/c-nu/nu裸鼠作为试验对象。
我们在本试验中选取了BT传代细胞的F10、F25、F35代细胞,以皮下注射的方式接种裸鼠,综合判定其对裸鼠的致瘤性。
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3. 研究的方法与方案
实验方案一:每种BT细胞样品和阳性对照组、阴性对照组各接种裸鼠2组,其中活细胞1组,冻融细胞1组。
每组10只裸鼠,雌雄各半。
共分为十组,每只裸鼠左侧或右侧腋下1 cm处皮下接种细胞悬液,接种剂量为0.2 mL/只。
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4. 研究创新点
牛睾丸原代细胞是目前生产细胞型猪瘟弱毒疫苗的最主要细胞源,最初试制猪瘟牛睾丸细胞苗时也用原代细胞接毒。
生产中发现原代细胞接毒后,虽然毒液毒价较高,但细胞易脱落,收次低。
改用次代细胞接毒。
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5. 研究计划与进展
BT细胞作为生产猪瘟疫苗的细胞系,预期应没有致瘤的副作用。
CEF活细胞组作为阴性对照,不会使裸鼠致瘤。
冻融细胞组因反复冻融三次,细胞已失去活性,不会致瘤。
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