1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
溶杆菌属于黄单胞科（Xanthomonadaceae），γ-变形菌门（grammaproteobacteria）（ChristensenCook,1978)，该属细菌对许多微生物，如细菌、真菌、单细胞藻类和线虫都有拮抗活性，是一类具有生防和医用潜力的革兰氏阴性菌（Palumboetal.,2003;Lietal.,2006;Qianetal.,2009）。近年来，通过系统发育分类学方法完善了溶杆菌属的分类地位，截至2013年，已发现28个种。
溶杆菌具有很强的溶菌抑菌效果，是重要的生防细菌。早期对其活性研究主要集中于各种胞外酶如α-蛋白酶、几丁质酶和β-1，3-葡聚糖酶等。它们作用于病原菌的细胞壁等靶点，从而引起溶菌抑菌。此外，分泌的脂解酶和几丁质酶可溶解和破坏线虫体壁及卵壳。近年来，溶杆菌产生的小分子活性物质备受关注，如HSAF（HeatStableAntifungalFactor）、WAP-8294A2、Lysobactins、Tripropeptins和Cephabacins等。
HSAF（HeatStableAntifungalFactor）是产酶溶杆菌中新报道的一种结构全新的广谱型抗真菌物质，对人类和植物无害，是一种环境友好的新型抗菌物质（Yuetal.,2007）。它通过抑制真菌神经酰胺合成酶活性，改变丝状真菌细胞膜中的鞘脂类化合物的组成，从而影响真菌菌丝的极性生长（Lietal.,2006）。WAP-8294A2是产酶溶杆菌合成的一种抗革兰氏阳性细菌的环十二肽类抗生素。该抗生素对人体病原细菌--金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）具有高效抗菌活性，已在日本进而临床二期，有望近期投入市场，是一种重要的新型医用抗生素。Lysobactins又名katanosinB，分离自Lysobactersp.SC14067发酵液，它是一个含有11个氨基酸的九元大环内酰胺（OSulivnaJetal.,1988），对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐万古霉素肠球菌(VRE)有很强的抑菌活性。通过分子识别和合成细菌细胞壁的前体脂质‖结合，抑制了细菌的转糖苷作用（MakiHetal.,2001）。Tripropeptins是由Lysobacter.spBMK333-48F3合成的抗MRSA和VRE的环状酯肽类抗生素。已发现Triponrepitns的6个组分，均为正异构脂肪酸链，命名为Tripropeptin（TPP）A,B,C,D,Z和E，其中TPPC为主要组分，占71.3%，而TPPD的抑菌效果最强（HashizumeHetal.,2001）。Cephabacins是由L.lactamgenus.合成的β-内酰胺类抗生素，由1个头孢烯环，1个乙酸残基和1个寡肽(1分L-精氨酸和3分子L-丙氨酸)组成，乙酸残基和寡肽对Cephabacins的抑菌功能起着关键性作用（NozakiYetal.,1984）。
2. 研究的基本内容和问题
（一）研究目标
拟利用抗生素筛选法，初步建立溶杆菌快速筛选体系。在此基础上，分离鉴定大量溶杆菌菌株，并对其进行生防效果初步评估，为本实验室建立了一个小型的溶杆菌资源库，为后续研究奠定基础。
（二）研究内容
3. 研究的方法与方案
（一）研究方法
利用不同种类和浓度的抗生素对实验室已有的溶杆菌菌株进行了抗生素耐受水平评价，在此基础上，利用抗生素筛选法，初步建立溶杆菌快速筛选体系。利用建立的筛选体系对土壤浸出液中的细菌进行筛选，得到溶杆菌菌株。选取酵母、水稻纹枯、腐霉、野油菜黄单胞、马铃薯环腐作为靶标菌，进行拮抗实验。同时利用16SrDNA、gyrB对分离到的菌株进行鉴定。选取拮抗效果较好的菌株进行HSAF和WAP-8294A2这两种活性物质的提取，期望得到有生防价值的新型溶杆菌菌株。
（二）技术路线（见附件）
4. 研究创新点
拟建立一种新型的快速便捷的溶杆菌菌株筛选体系，为分离具有生防潜力的新型溶杆菌菌株奠定基础。
5. 研究计划与进展
1、2013年04月2013年05月：查阅文献
2、2013年06月2009年07月：建立溶杆菌快速筛选体系
3、2013年08月2013年10月：利用建立的体系进行溶杆菌筛选
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