1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
氮是动物生长、发育和生产过程中所需的营养元素,缺少则导致正常生长发育受阻和生产性能下降;反之,在造成资源浪费的同时严重污染环境[1]。
随着养猪业规模化、集约化的发展,蛋白质饲料资源短缺问题显得日益突出。
为了提高蛋白质利用率,减少氮排放,在猪生产中采用低蛋白日粮同时平衡多种必需氨基酸成为较好的策略。
2. 研究的基本内容和问题
1.研究目标研究日粮粗蛋白水平分别降低 3%、6%同时平衡赖、蛋、苏、色氨酸四种必需氨基酸,对猪生长性能、绒毛高度、隐窝深度、消化酶活力、血清生理生化指标的影响。
2.研究内容1)日粮蛋白水平对生长性能的影响测定实验猪采食量和体增重等指标。
2)日粮蛋白水平对肠道形态影响肠道食糜及组织样品的采集与预处理:实验最后一天禁食12h后屠宰,十二指肠、空肠、回肠分离并结扎幽门瓣、回盲瓣,清洗后固定12-24h ,进行HE 染色,观察小肠组织形态并测定绒毛长度与隐窝深度。
3. 研究的方法与方案
1.研究方法及实验方案1)肠道组织样品的采集与预处理屠宰后将十二指肠、空肠、回肠分离并结扎幽门瓣、回盲瓣,用手术剪剪取 2cm 肠段,经PBS 缓冲液清洗后,置于含有 4%的多聚甲醛溶液中固定,12-24h 后,经脱水、透明、透蜡、包埋、切片,然后进行 HE 染色,以备观察小肠组织形态并测定绒毛长度与隐窝深度。
2)胃肠道食糜的采集与预处理屠宰后,剖开腹腔,结扎幽门瓣、回盲瓣,取出消化器官,分离并结扎胃、空肠和回肠,迅速取出胃、空肠、回肠食糜样品,将食糜样品置于灭菌的 2m L 冻存管,上述所有操作过程均在冰冷的台面上进行。
所有的样品在取出后迅速放入液氮中冷冻,然后送回实验室保存于-20℃冰箱,用于消化酶活力的测定。
4. 研究创新点
1)在已知的低蛋白日粮研究成果中,低蛋白日粮已经被证明可以影响仔猪发育,对仔猪、育肥猪的血液激素、小肠形态均有影响。
目前主要研究多集中在低蛋白日粮饲喂某一阶段的影响,没有研究持续性降低蛋白日粮对猪的生长性能、小肠形态、血液激素消化酶的影响,因此,本研究方向具有前沿性和创新性。
2)本研究将采用HE 染色切片、全自动生化分析仪、酶测定等各种技术手段,从生长性能、消化酶、小肠形态、血液激素多个方面综合测定低蛋白日粮的影响,具有研究方法和实验设计的全面性。
5. 研究计划与进展
2017年8月-12月:进行预实验,准备正式实验,每周进行生长性能测定,0W、5W、10W、16W,进行体重测量。
2018年1月-2月:屠宰实验,进行样品采集与预处理,进行生长性能测定;小肠绒毛高度与隐窝深度的测定;消化酶活力与 pH 的测定;血清生化指标的测定。
2018年3月-5月:总结分析整理并撰写文章。
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