1. 研究目的与意义
研究内容：
研究内容一：前列消癥汤诱导多种前列腺癌细胞株发生自噬与凋亡
1） 凋亡现象的发现与认证
2. 文献综述
细胞自噬与凋亡在肿瘤发展过程中作用的研究进展
陆 鹭
【摘 要】:自噬与凋亡是程序性死亡(programmed cell death，PCD)的两种方式，均涉及一系列基因的激活、表达及调控。自噬是广泛存在于真核生物中的生命现象，在进化上高度保守。自噬与凋亡对于维持机体内环境的稳态和正常的生长发育有重要的意义，并且在肿瘤的发展过程中也起到不同程度的调控作用。自噬与凋亡在发生过程中存在着某些交叉串扰，使二者之间能够发生相互作用，而这种相互作用又对肿瘤的发展产生复杂的影响。本文分别从自噬与凋亡的发生过程、自噬与凋亡之间的相互作用和自噬与凋亡对肿瘤发展过程的影响作一综述。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：
1.前列消癥汤诱导多种前列腺癌细胞凋亡
1） 前列消癥汤作用后PC-3细胞凋亡情况：取对数生长期前列腺癌细胞，CO2培养箱中培养24 h后，弃原培养液，设置空白对照组、4.29 mg/mL、6.13 mg/mL、8.75 mg/mL 前列消癥汤加药36 h组、8.75 mg/mL 前列消癥汤加药24 h 组、8.75 mg/mL 前列消癥汤加药12 h组，以及50 g/mL 5-Fu阳性对照组。各组均按10%终体积加样。空白对照为含细胞的等体积培养基。加样培养后，收集各组细胞，按照AnnexinV-FITC/ PI凋亡检测试剂盒说明书进行细胞凋亡试验操作。分析Annex in V / PI- ( 早期凋亡细胞) 的百分比以及Annex in V / PI ( 晚期凋亡和死亡细胞) 的百分比。
4. 工作计划
2022.02.26-2022.03.02 查阅并整理文献资料
2022.03.02-2022.03.03 完成开题报告
2022.03.08-2022.05.31 进行课题实验
5. 难点与创新点
1)研究思路富有中医特色：从中医治法着手，探讨健脾活血解毒法治疗前列腺癌的科学本质，结合前期研究，提出前列消癥汤诱导前列腺癌细胞自噬可能是其抑制肿瘤的微观机制之一。
2)研究方法手段创新：本项目采用临床→实验室→临床，整体→细胞→整体，体内→体外→体内的研究策略，有利于开阔思路，体现了中医药转化医学研究思路。同时本项目重点围绕阐述前列消癥汤诱导前列腺癌自噬与凋亡之间的关系这一科学问题，综合利用多种先进的分子生物学手段包括RNAi、信号通路阻断技术、免疫荧光等技术从从基因mRNA和蛋白质表达水平研究。
3)研究内容创新：首次结合目前研究较为成熟的自噬信号途径及其上下游相关重要调控因子，从基因mRNA和蛋白质表达水平研究健脾活血解毒中药抗肿瘤机理。
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