1. 研究目的与意义
1.1染料木素
染料木素(Genistein,Ge),化学名4'',5,7-三羟基异黄酮,是在大豆和大豆产品中发现的大豆异黄酮的主要存在形式之一。作为一种常见的多酚类物质,染料木素是一种苷元型的大豆异黄酮单体,可直接被人体消化吸收,具有植物雌激素的活性[1]。此外染料木素还具有许多健康促进作用,例如降低心血管疾病的风险[2],降低前列腺癌,乳腺癌和结肠癌的发病率,改善骨骼健康以及减轻绝经后症状,[3,4]同时可以在G2 / M过渡时拮抗人黑色素瘤细胞生长[5],并发现其可抑制 H2O2/Cu(II)介导的DNA链断裂。[6]与雌二醇-17β的结构相似性使染料木黄酮具有部分雌激素活性及抗氧化活性[4,7,8],染料木素中位于C-4位置的OH基团,表现出了较强的抗氧化活性,使其具有了清除活性氧的功能。
2. 研究内容和预期目标
研究内容:酪蛋白与染料木素通过相互作用复合,从而增加染料木素水溶性与生物利用度
1)制备染料木素-酪蛋白复合物;
2)通过紫外、粒径分析、荧光光谱仪等手段测定复合物性质及最大负载率;
3. 国内外研究现状
3.1多酚与蛋白结合的相互作用机理
此前国内的江南大学食品科学与技术国家重点实验室在多酚与酪蛋白的相互作用与应用上具有一定的研究进展,薛瑾,谭晨,夏书芹,张晓鸣等人[23,24]制备了基于酪蛋白的表没食子儿茶素-3-没食子酸酯纳米载体,并采用高效液相色谱、动态光散射、透镜电子显微、体外释放和荧光光谱等手段对EGCG(没食子儿茶素没食子酸酯)-酪蛋白纳米复合物的制备与形成机理进行了研究,发现酪蛋白,特别是糖基化酪蛋白,可以有效保护EGCG免受碱性pH的降解,并在肠液中显示出缓慢而持续的释放,并确认EGCG与酪蛋白的猝灭类型为静态猝灭,两者的主要相互作用为氢键作用,且结合强度受温度影响较大,葡聚糖诱导的空间位阻可抑制这种相互作用。而何志勇,徐明珠等人[25]则通过对于锦葵素与α-CN,β-CN的相互作用研究,发现α-CN,β-CN主要通过亲水或疏水相互作用与MG(锦葵花素葡萄糖苷)结合,同时这种结合能不同程度上改变α-CN、β-CN的二级结构,且锦葵素与α-LA结合能力强于β-CN,此外,酪蛋白保护了锦葵素,增强了锦葵素的稳定性,延缓锦葵素在高温、氧化以及光照条件下的降解。
吉林长春的吉林农业大学与国家大豆产业技术体系加工研究室则对于苷元型异黄酮与大豆分离蛋白相互作用有较深入的研究,任云芃等人[26]用光谱学手段研究大豆素/染料木素与大豆分离蛋白之间的作用机制,确定大豆素/染料木素改变了SPI氨基酸残基的微环境,使得SPI构象改变,大豆素/染料木素对SPI作用的猝灭方式为静态猝灭,作用力为氢键和范德华力,结合位点为1,同时发现同一质量浓度下,染料木素较大豆素与SPI相互作用更强,对蛋白质的结构变化影响更大,影响大豆素/染料木素对SPI结构差异化的原因是苯甲酰基环上的羟基化可以增强其和SPI的亲和力。吕思瑶等人[27]则对其中的染料木素与大豆分离蛋白的素共价交联作用进行的深入研究,,发现二者的共价交联能够影响蛋白的表征与结构,共价交联后蛋白质的色氨酸与酪氨酸残基所处的微环境疏水性减少,蛋白质二级结构中-螺旋含量增多、β-折叠含量减少、β-转角含量增多、无规则卷曲含量减少。
4. 计划与进度安排
1.2022年11月底前——完成选题工作;
2.2022年12月底前——完成开题工作和论文培育立项工作;
3.2022年3月底前——完成初稿和选题复查和中期检查工作;
5. 参考文献
[1] 雷海容,梁洪祥.高纯度大豆染料木苷的制备工艺研究[J].食品科技,2021,46(1):199-204.
[2]Si, H. W.; Liu, D. M. Phytochemicalgenistein in the regulation of vascular function: New insights Curr. Med. Chem.2007, 14, 2581– 2589.
[3]Marini, H.; Minutoli, L.; Polito,F.; Bitto, A.; Altavilla, D.; Atteritano, M.; Gaudio, A.; Mazzaferro, S.;Frisina, A.; Frisina, N.; Lubrano, C.; Bonaiuto, M.; D''Anna, R.; Cannata, M.L.; Corrado, F.; Adamo, E. B.; Wilson, S.; Squadrito, F. Effects of thephytoestrogen genistein on bone metabolism in osteopenic postmenopausal women—Arandomized trial Ann. Intern. Med. 2007, 146, 839– 847.
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