1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）
摘要小细胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC）占所有肺癌的13%～15%，是一种神经内分泌肿瘤，以高度侵袭性，生长迅速，伴癌旁内分泌和早期广泛转移为特征[1]。
此病对放化疗较敏感，初治缓解率高，《NCCN小细胞肺癌临床实践指南》指出，顺铂 依托泊苷是SCLC的一线化疗联合用药方案，具有良好治疗效果[2]。
然而，大量动物实验和临床用药经验表明，依托泊苷对胎儿具有发育毒性。
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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案
一．研究内容（1）学习斑马鱼的饲养，产卵和斑马鱼胚胎的培养方法；（2）摸索抗肿瘤药物依托泊苷对斑马鱼胚胎的最大安全剂量；（3）观察非致死剂量下依托泊苷对斑马鱼胚胎各组织器官发育的影响；（4）评价非致死剂量下依托泊苷对斑马鱼胚胎血管发育的影响。
二．研究手段1.斑马鱼胚胎的培养内皮细胞中表达增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的转基因斑马鱼Tg（flk -1：EGFP），在28℃下自然交配得到胚胎，此时记为0dpf (day post fertilization, dpf)，挑选正常受精卵放至培养皿中，加入适量含1－苯基2－硫脲（PTU）的胚胎培养液，每皿不超过100枚，置于28℃恒温培养箱中培养。
2.斑马鱼的急性毒性实验根据OECD指南，取1dpf 的转基因斑马鱼胚胎置于24孔板中，每孔随机放入10个胚胎置于1ml的药液中，此时记为0dpt(day post treatment, dpt)。
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