1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
(一)本课题的意义
水稻中的蛋白激酶几乎参与了水稻所有的信号转导过程,己有的研究表明,在水稻中,感受环境变化的蛋白分子往往是受体激酶,包括对病原物侵袭,低温等外界刺激的应答反应,对激酶功能的了解将极大地增进对水稻抗病等逆境反应机理的了解。发掘水稻抗稻瘟病相关基因,阐明其抗病机理,对于研究水稻-稻瘟病菌互作及抗病育种具有重要意义。
(二)国内外研究概况
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2. 研究的基本内容和问题
一)研究目标
本研究的目标为在前人已筛选到稳定遗传的感病植株的基础上,筛选太湖流域粳稻地方品种黑壳子粳中的抗稻瘟病基因,克隆水稻磷酸蛋白激酶OsSTPK1,进行体外表达,并对其活性进行初步的分析。
(二)研究内容
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3. 研究的方法与方案
(1)研究方法
采用重组DNA技术,将不同来源的DNA分子在体外进行特异切割,重新连接,组装成一个新的杂合DNA分子。这个杂合分子能够在一定的宿主细胞中进行扩增,形成大量的子代分子。基因表达包括以DNA为模板合成mRNA的过程和以mRNA作为模板将活化的氨基酸在核糖体上装配为蛋白质多肽链的翻译过程。
(2)技术路线
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4. 研究创新点
本研究以水稻为材料开展磷酸蛋白激酶OsSTPK1克隆及表达鉴定的研究,是了解其代谢调控机理的重要前提,将丰富人们对生物体内的信号传递途径的了解,促进植物发育调控机理的研究。并为发掘水稻抗稻瘟病相关基因,阐明其抗病机理,研究水稻-稻瘟病菌互作及抗病育种具有重要意义。
5. 研究计划与进展
2013年4月-6月,获得水稻磷酸蛋白激酶OsSTPK1,构建克隆载体。
2013年7月-8月,进行体外重组克隆,筛选阳性克隆。
2013年9月-12月,构建过表达载体,检测水稻Str/Thr蛋白激酶OsSTPK1的表达。
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