1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
1.课题研究意义： 马铃薯甲虫[Leptinotarsa decemlineata (Say)],隶属于鞘翅目叶甲科，是世界上著名的毁灭性检疫害虫，最先发现于北美洲落基山脉，于20世纪90年代初期传播入中国新疆伊犁地区，自此向东蔓延［1］。
目前，马铃薯甲虫大面积分布于新疆木垒县、伊犁、石河子、塔城等地区，扩散距离达到约900km。
马铃薯甲虫主要危害马铃薯等茄科作物，其成虫及幼虫都取食马铃薯叶片成缺刻状。
2. 研究的基本内容和问题
明确吡虫啉处理对马铃薯甲虫nAChR基因表达量的影响。
利用定量PCR分析比较不同浓度吡虫啉处理下新疆察布查尔及尼勒克马铃薯甲虫幼虫所有已知nAChR亚基基因的相对表达量。
3. 研究的方法与方案
1、研究方法、技术路线、实验方案 分别将用不同浓度吡虫啉处理过的新疆察布查尔县和尼勒克马铃薯甲虫幼虫提取总RNA，反转录为cDNA模板后，采用ABI 7300实时PCR系统，以SYBR Green为染料，测定马铃薯甲虫nAChR α1-10、β1亚基基因的相对表达量。
为了缩短反应时间，采用了两步法进行PCR，总反应体系20 μl。
按下列组份配制PCR反应液(在冰上进行):根据SYBR Premix Ex TaqTM(Perfect Real Time),Takara试剂的试验指南:PCR体系(20μl)如下:SYBR Premix Ex Taq(2) 10μlPrimer-F 1μlPrimer-R 1μlcDNA 1μlROX Reference Dye(50)0.4μlSterile deionized H2O 6.6μl总体积 20μlPCR程序为: 温度95℃，时间30 sec，进行如下循环: 95℃ 5sec，60℃ 31sec，循环数为40;95 ℃ 15 sec,，60℃ 1min，95 ℃ 15 sec,，60℃ 15 sec。
4. 研究创新点
通过定量分析吡虫啉处理的马铃薯甲虫nAChR基因表达量变化，为吡虫啉与马铃薯甲虫nAChR亚基作用机制提供依据。
5. 研究计划与进展
2016.08：进一步熟悉课题内容，收集资料 （15篇文章以上； 2016.09：收集资料，制定总体方案，并与指导教师讨论； 2016.10-2016.12：有计划地快速利用定量PCR分析不同浓度吡虫啉处理对马铃薯甲虫幼虫的nAChR所有已知亚基基因的相对表达量； 2017.01：整理有关数据，进行汇总分析； 2017.02-2017.04：撰写文献综述、毕业论文等，准备答辩。
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