烟草开花调控基因的筛选及表型鉴定开题报告

 2023-02-17 09:39:56

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

烟草是我国重要的经济作物之一,烟草行业在我国的国民经济总量中占有很大的比重。

目前,我国烟草的种植总面积和总产量均居世界首位,栽培生产烤烟主要集中在云南、贵州、四川、河南、湖南、福建等地,在我国西北、东北部分地区也栽种了少量的黄花烟。

栽培的品种主要为普通烟草(Nicotiana tabacum L.)和黄花烟草两种(Nicotiana rustica L.)。

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2. 研究的基本内容和问题

本课题的目标:筛选出对烟草开花具有调控作用的基因并进行表型鉴定。

本课题的研究内容烟草早花是指烟草植株在正常的栽培条件下,未达到在当地栽培条件下应有的株高和叶片数便加速完成生长发育进程而过早现蕾,严重影响烟草产量及品质的一种异常现象,是生长发育异常化的结果。

烟草早花在国内外烟草生产中都极为常见,所以应对烟草开花的功能基因进行研究筛选,培育优质的抗早花品种,降低烟草早花对烟株产生的不利影响。

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3. 研究的方法与方案

研究方法:病毒诱导基因沉默(VIGS)技术筛选候选基因技术路线:1.得到候选基因 2.VIGS基因沉默载体的构建 3.种植本氏烟草 4.叶期对烟株进行VIGS侵染 5.开花时间及开花时叶片数观察、分析 6.基因筛选及鉴定实验方案:1.培养本氏烟草将饱满健康的本氏烟草种子播散在含有基质(营养土:蛭石的体积比为1:1)的直径10厘米的方形塑料培养盆中,每盆播种1-2粒种子。

将播种好的盆放入培养室中培养(培养条件;22℃,光照白天16小时/晚上8小时,湿度60%),每周浇水2-3次,至3叶期备用。

2.VIGS载体构建及转化利用primer5软件设计候选基因VIGS靶标片段的上下游引物,利用本氏烟草RNA逆转录cDNA为模板,通过PCR扩增获得VIGS靶标片段。

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4. 研究创新点

本实验的创新之处体现在如下两个方面:1. 烟草早花是是国内外烟草生产中的常见危害之一,严重影响了烟叶的产量、品质和经济效益。

烟草早花机理十分复杂,目前为止尚未形成一个全面统一的理论体系,国内主要的研究方向集中在品种、光周期诱导、温度影响三个方面。

通过VIGS技术对烟草开花调控基因进行筛选,进一步阐明烟草早花的分子机理,目前国内外鲜有相关报道。

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5. 研究计划与进展

2017.08.10-2017.10.20候选基因载体构建2017.9.27-2017.10.20在温室(22、16h光照8h黑暗处理)进行本氏烟草的种植2017.10.20-2017.11挑选生长状态一致,三叶期的烟草进行VIGS技术处理2017.11.20-2017.12.20进行表型观察,对植株生长状态以及开花的时期和叶片数进行统计2018.1-2018.4采用excel/spss等软件对数据进行整理,分析2018.4-2018.6实验总结,撰写论文

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